生殖科专家对第二代试管婴儿的详细介绍

试管婴儿技术经过多年的发展，已经衍生出众多技术，其中第二代试管婴儿，是在显微镜下将一个精子直接注射到卵细胞浆内使之受精，称为卵细胞浆内单精子注射(Intracytoplsmic Sperm Injection,ICSI)，第二代试管婴儿技术有多少人了解?为此医院生殖中心专家进行了介绍。

一、ICSI的优点

1.精子无需发生顶体反应，其他常规技术无法受精的严重男性不育患者，采用ICSI法受精可获得妊娠，包括冷冻精子或精子数目极少的不育夫妇，无顶体的圆头精子，无法与卵子融合或穿越透明带的顶体后鞘精子等;

2.在显微注射前，精子无需特殊处理;

3.受精结果不受精子浓度，精子活动度和精子形态的影响。

二、适应症

1.严重的少，弱，畸精子症

2.梗阻性无精子症 如输精管阻塞或缺如等。

3.生精功能障碍对多次精液检查证实为无精症的患者，在证实染色体无异常睾丸穿刺有生精细胞，精子细胞者，可行睾丸或附睾取精进行ICSI.

4.男性免疫性不育。

5.精子无顶体或顶体功能异常。

6.多次体外受精----胚胎移植(IVF-ET)受精失败。

三、禁忌症

染色体异常或严重先天畸形。

四、步骤

1.常规IVF-ET超排卵方案。

2.监测卵泡发育与适时注射HCG 与常规IVF-ET相同。

3.取卵 与常规IVF-ET相同。

4.卵母细胞的处理 取卵后3-4小时，必须对卵母细胞进行特殊处理，以去掉卵丘及颗粒细胞，暴露裸卵。再将卵比较低转移到培养液内精洗数次，在高倍镜下确认卵细胞的成熟度，然后转移到显微操作皿中置培养箱内待用。

5.精子的准备 不同来源的精液标本应采取不同的处理方法：

(1)通过射精获得的精液多采用上游法或微量Percoll梯度离心法来处理，最后以培养液稀释和调整精子浓度，置培养箱待用;

(2)冷冻精液多以微量Percoll梯度离心法来处理;

(3)对睾丸或附睾取精者，可采用微量Percoll梯度离心法来处理，也可不经任何处理直接置入ICSI培养皿待用。

6.显微注射

(1)ICSI技术的关键

1.精子注射入卵细胞浆前必须完全制动，其目的为：使精子细胞膜破裂 精子被注入胞浆后，卵子的胞浆因子通过破损的精子膜进入精子胞浆使精子头去凝集，同时精子的胞浆因子进入卵细胞浆激活卵子。避免精子在降低粘度的卵细胞浆中恢复活性，因为精子尾的活动可破坏细胞器。

2.精子真正注入卵细胞浆并不被逐出。

3.避免卵子损伤。

(2)ICSI的步骤

1.精子的制动。

2.卵细胞浆内单精子注射。

在操作皿的每一个微滴内加入一个经脱颗粒处理的卵母细胞，用显微固定针固定卵细胞，同时卵细胞必须与培养皿底部接触，以保证精子注射过程中，培养皿可以从底部支持卵子。

将显微注射针与卵子均调节至最清晰状态，使注射针位于卵子的正中部位，卵子的极体位于12或6点位置。

将精子推至注射针尖端外，注射针于3点的位置垂直穿越透明带及卵子胞浆膜进入胞浆内，回收部分胞浆至胞浆膜破裂，然后将回收的胞浆连同精子一起小心地注入胞浆，最后撤出注射针，把精子留在胞浆内。

注射后，卵子胞浆膜将缓慢恢复正常形态(约1-5分钟)

检查精子是否留在胞浆内，如果精子被注射到卵周间隙，则需要重复注射一次。将注射后的卵了在培养液中继续培养。

将注射后的卵子在培养皿中冲洗数次，然后转移至新鲜的培养液中继续培养。

7.检查受精，胚胎培养 与常规IVF-ET相同。

8.胚胎移植 与常规IVF-ET相同。

选择质量较好的胚胎移植入宫腔，每次移植的胚胎不超过4个。

9.黄体支持 与常规IVF-ET相同。

10.妊娠鉴定 与常规IVF-ET相同

生殖中心专家进行了有关第二代试管婴儿技术的介绍，并率先开展了第三代试管婴儿PGD技术，大大提高了试管婴儿成功率且合法选择性别。